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软骨素半成品含量(软骨素半成品含量测定方法)

admin 科普 2024-07-01 17:49:10 浏览:8 次数

软骨素半成品含量测定方法

软骨素是一种重要的生物活性物质,被广泛用于预防和治疗骨关节疾病。为了保证软骨素的质量和有效成分含量,需要对软骨素半成品进行含量测定。以下是软骨素半成品含量测定方法。

材料和仪器

1. 乙醇:纯度为95%。

2. 酸性蛋白酶:纯度为99%。

3. 软骨素半成品。

4. 液氮。

5. 无水乙醚。

6. 丙酮:纯度为99.7%。

7. 聚乙二醇20000。

8. 紫外分光光度计。

测定步骤

1. 取适量软骨素半成品,加入10倍体积的乙醇中。在4℃下摇动24小时。

2. 用酸性蛋白酶对软骨素溶液进行消化,消化后离心10分钟,取上清液。

3. 将上清液冷冻至液氮中,待其全部冻结后用无水乙醚漂洗。

4. 加入少量丙酮使之融化,反复冻融2次,使其彻底脱水。

5. 加入25mL聚乙二醇20000,用磁力加热器加热至90-95℃,持续搅拌5分钟,然后离心,取上清液。

6. 用紫外分光光度计测定上清液的吸收值,根据吸收值计算软骨素半成品的含量。

注意事项

1. 操作过程应在冷室或常温下进行。

2. 丙酮使用前需加入5%纯水。

3. 聚乙二醇20000需预先加热至80℃以上溶解,不可超过100℃。

4. 上清液比较浑浊时,可以用0.22μm的滤膜过滤。

5. 实验中的所有试剂均需是高纯度的。

总结

软骨素半成品含量测定方法是保证软骨素质量的重要手段。该方法可以有效地测定软骨素半成品的含量,提高软骨素的质量和有效成分含量,从而更好地发挥其治疗和预防骨关节疾病的功效。


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